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即用型PCR試劑盒

豬腦心肌炎病毒 RT-PCR 檢測試劑盒

文字:[大][中][小] 2017-6-4    瀏覽次數:2328    
產品及特點:


腦心肌炎病毒(Encephalomyocarditis Virus,EMCV)在分類上屬小
RNA 病毒科,心肌病毒屬,是一種無囊膜的單股正鏈 RNA 病毒。由 EMCV 引
起的豬腦心肌炎是豬的一種以腦炎、心肌炎或心肌周圍炎為主要特征的急性傳染
病,給養豬業造成了極大的經濟損失。本產品適用于檢測豬血清、腦、心肌以及
淋巴結等組織標本或病毒培養液中 EMCV 的 mRNA,適用于 EMCV 感染的輔
助診斷。它具有下列特點:
1. 用于 EMCV 的定性鑒定檢測和分子流行病學調查。
2. 能對樣品中 EMCV 進行快速檢測,具有良好的特異性和敏感性。
3. 使用一管式 RT-PCR 試劑盒,減少了操作步驟,降低了操作誤差


運輸及保存:



 低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。


使用方法:


一、樣品 RNA 的制備
用自選方法純化 EMCV 樣品的 RNA,也可以另購本公司的一管式病毒
RANout 或柱式病毒 RNAout,上述兩款產品跟本試劑盒兼容。
二、陽性對照
1. 為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對
照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 使用本陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。
最好在專門的區域操作。
三、設置 RT-PCR 反應(30 uL 體系)
3. 在 PCR 管中加入下列成分:
成 份 樣品 陽性對照 陰性對照
雙酶一管式 RT-PCR Buffer,2× 15 uL 15 uL 15 uL
EMCV 專一性引物對 2 uL 2 uL 2 uL
樣品 RNA 1-5 uL 無 無
EMCV 陽性對照 無 2 uL 無
補超純水到 28 uL 28 uL 28 uL
MMLV-Taq Mix 2 uL 2 uL 2 uL
4. 輕柔混勻后上機,按下面參數進行 RT-PCR。
過程 溫度 時間
逆轉錄 60℃ 30 分鐘
預變性 94℃ 5 分鐘
PCR 反應
(30 個循環)
94℃ 30 s
55℃ 30 s
72℃ 30 s
延伸 72℃ 5 分鐘
5. 電泳檢測 RT-PCR 產物。預期的 PCR 產物長度為 286 bp。

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